AGAROSE GTG (Grau Técnico Genético)
Código Nº:
13-15005-05 – 500 g
13-15005-01 – 100 g
NCM: 29420000 CEST:00
Armazenamento: Temperatura Ambiente
Descrição:
Agarose grau técnico genético (GTG) é uma agarose “low melting temperature” utilizada na separação por eletroforese de fragmentos de ácidos nucléicos entre 100 a 23.000 pb.
Especificações analíticas:
Temperatura de polimerização (gel 4%): 26°C-30°C
Temperatura de fusão (Melting temperature) (gel 1,5%): ≤ 65°C
Sensibilidade (gel 4%): ≥200 g/cm²
Aplicações:
- Separação de fragmentos acima de 1.000 pb.
- Manipulação enzimática direta de DNA
- Separação e recuperação de fragmentos de DNA de tamanhos muito grandes
Concentrações da Agarose-GTG sugeridas:
| Tamanho (pares de bases) | Concentração Final de Agarose (%) | |
| 1X TAE Buffer | 1X TBE Buffer | |
| 500 – 25.000 | 0,75 | 0,70 |
| 300 – 20.00 | 1,00 | 0,85 |
| 200 – 12.000 | 1,25 | 1,00 |
| 150-6.000 | 1,5 | 1,25 |
| 100-3.000 | 1,75 | 1,50 |
| 50-2.000 | 2,00 | 1,75 |
Mobilidade do corante:
Taxa de migração de DNA fita dupla em relação ao azul de bromofenol e ao xileno cianol em géis de agarose-GTG
| 1X TAE Buffer | % | 1X TBE Buffer | ||
| XC (xileno cianol) | BPB (azul de bromofenol) | Agarose | XC | BPB |
| 11.700 | 1.020 | 0,50 | 6.100 | 400 |
| 4.000 | 500 | 0,75 | 2.850 | 280 |
| 2.300 | 350 | 1,00 | 1.700 | 180 |
| 1.500 | 200 | 1,25 | 1.000 | 100 |
| 1.000 | 150 | 1,50 | 700 | 70 |
| 700 | 100 | 1,75 | 500 | 50 |
| 550 | 60 | 2,00 | 400 | 30 |
| 320 | 30 | 2,50 | 250 | 10 |
Precauções no uso e na preparação:
Quando estiver realizando a fusão da agarose-GTG em temperaturas elevadas, observar cuidados para evitar queimaduras no operador e nas pessoas próximas. Utilizar sempre proteção para os olhos quando dissolver a agarose-GTG.
Instruções de preparação do gel de agarose em forno de microondas:
- Utilizar um béquer de 2 a 4 vezes maior em volume do que a solução de agarose-GTG a ser preparada,
- Pesar a quantidade de agarose-GTG em pó necessária para a preparação do gel de interesse,
- Adicionar o tampão de eletroforese 1X ou 0.5X e misturar com auxilio de barra e agitador magnéticos dentro de um béquer,
- Retirar a barra magnética, principalmente se essa não for de teflon,
- É recomendável deixar a agarose-GTG no tampão por 5 minutos antes de colocar para aquecer. Este procedimento diminui a tendência da agarose provocar pequenas explosões durante o aquecimento,
- Cobrir o béquer com folha plástica (wrap plastic), cuidando para fazer alguns furos para ventilação e para não explodir quando em ebulição,
- Ferver a agarose por aproximadamente um minuto e, retirar com muito cuidado da fonte de calor utilizando luvas de proteção,
- Deixar esfriar a solução entre 50°C a 60°C antes de colocar no suporte de acrílico,
- Esvaziar o conteúdo dentro de um suporte de plástico com o pente e deixar polimerizar.
